การศึกษาคุณสมบัติการลดการเพิ่มจำนวนไวรัสของเซลล์ที่ติดเชื้อ และคุณสมบัติการเกิด cross-reactivity และลักษณะเอพิโทปของโมโนโคลนอลแอนติบอดีมนุษย์ที่เฉพาะต่อโปรตีน NS1 ของเชื้อเดงกี่ไวรัส (ปีที่ 2)

Abstract

โรคไข้เดงกี่และไข้เลือดออกเป็นหนึ่งในโรคที่เกิดการติดต่อโดยยุงที่มีความสำคัญทางสาธารณสุข ซึ่งอาการรุนแรงของโรคไข้เลือดออกส่วนใหญ่เกิดจากการมีปริมาณไวรัสในกระแสเลือดในปริมาณมาก โดยมีสาเหตุใหญ่เกิดจากการติดเชื้อครั้งที่สอง โดยเชื้อไวรัสเดงกี่ต่างสายพันธุ์ ที่เรียกว่า Antibody Dependent Enhancement (ADE) ซึ่งจากรายงานที่ผ่านมาพบว่าส่วนใหญ่เกิดจากกลุ่มแอนติบอดีที่จับเฉพาะกับโปรตีนผิว Envelop (anti-Envelop) และโปรตีน prM (anti-premembrane) แต่ในระยะหลังแอนติบอดีที่จับเฉพาะกับโปรตีน NS1 (anti-non-structural 1) ได้รับความสนใจมากขึ้นเนื่องจากมีการศึกษาถึงความสามารถของแอนติบอดีต่อโปรตีน NS1 ในการป้องกันและยับยั้งไข้เลือดออกทั้งในหลอดทดลองและสัตว์ทดลอง อย่างไรก็ตาม แอนติบอดีที่เฉพาะต่อโปรตีน NS1 นี้อาจมีผลให้เกิดความรุนแรงของโรคเนื่องจากคุณสมบัติในการเกิด cross-reaction กับโปรตีนมนุษย์ เช่น พลาสมิโนเจน ทรอมบินและเซลล์ endothelial ส่งผลให้เกิดอาการความรุนแรงของโรค เช่น การรั่วของพลาสมา (Vascular leakage) ดังนั้นเพื่อเป็นการศึกษาถึงบทบาทของแอนติบอดีต่อโปรตีน NS1 ทั้งในด้านการก่อความรุนแรงและความน่าจะเป็นในการพัฒนาเป็นวัคซีนหรือแอนติบอดีเพื่อการรักษา ในการศึกษาวิจัยครั้งนี้จะเป็นการผลิตและศึกษาคุณลักษณะของโมโนโคลนอลแอนติบอดีมนุษย์ที่เฉพาะต่อโปรตีน NS1 ของเชื้อเดงกี่ไวรัสทั้งหมด 12 ตัว โดยทำการศึกษาลักษณะความจำเพาะกับเชื้อเดงกี่ไวรัสด้วยวิธี immunofluorescense assay และโปรตีน NS1 ด้วยวิธี western blot โดยพบว่า แอนติบอดีที่เฉพาะต่อโปรตีน NS1 ทั้งหมดสามารถจับได้อย่างจำเพาะกับเชื้อเดงกี่ไวรัสสายพันธุ์ที่ 1-3 และจับอย่างจำเพาะกับโปรตีน NS1 ที่ขนาด 42-45 kda และทำการศึกษาส่วนของเอพิโทปเป้าหมายที่จับเฉพาะกับแอนติบอดีด้วยวิธี western blot กับโปรตีน NS1 ท่อนสั้นและคุณสมบัติการยับยั้งการเพิ่มปริมาณไวรัสในเซลล์ endothelial ซึ่งการศึกษาครั้งนี้เป็นการศึกษาคุณลักษณะและคุณสมบัติครั้งแรกของโมโนโคลนอลแอนติบอดีมนุษย์ที่จับเฉพาะต่อโปรตีน NS1 และกลไกการเกิดความรุนแรง รวมถึงคุณสมบัติการยับยั้งการเพิ่มจำนวนของไวรัส